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Rockland：TrueBlot系列IP欧宝体育官方

发布者：欧宝体育官方 科技    发布时间：2022-04-12     
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常规免疫沉淀（IP）的痛点：

抗体滤渣（IP）后的抗体印记（WB）时中断然牵扯到抗体滤渣用一抗(大多是IgG)的转性，对此假若安全使用传统文化艺术的二抗(非修复和修复型的IgG均能检查测量到)会在印记膜上有现杂带的干挠，也简言之说，是由于传统文化艺术的二抗能与修复型的IgG组合，在印记膜上表现出~55kDa的重连条带和~23kDa的轻连条带，等等均为非特异形条带，对抗体印记但是的剖析受到有很大干挠。 

为什么要选择TrueBlot ？

TrueBlot?欧宝体育官方 线旨在解决在对免疫沉淀 (IP) 或共免疫沉淀 (Co-IP) 样品进行蛋白质印迹时遇到的常见实验问题。TrueBlot?二抗的独特检测特性可识别天然（非还原）形式的 IgG而不是还原形式的 IgG，以消除 IP 抗体变性重链和轻链的干扰，当与TrueBlot? IP微珠搭配使用时，TrueBlot?欧宝体育官方 系列可助您轻松获得可重现的、出版质量的IP/Co-IP-Western印迹结果。

 

TrueBlot欧宝体育官方 介绍及结果展示：

  1. HRP标记TrueBlotTM系列二抗

TrueBlotTM系列二抗为美国ROCKLAND公司的专利欧宝体育官方 ，因为TrueBlotTM系列二抗能够特异性的结合带有天然二硫键结构的IgG(Goat, Mouse或Rabbit)，因此能够仅检测非还原型的IgG（一抗IgG天然构象）。

 

使用TrueBlotTM系列二抗则可避免上述情况，特异地检测出免疫沉淀而得的抗原(如下图）。

 

TrueBlot.jpg

当操作IP分离出来淀粉酶时，阻止抗原与的阶段目标淀粉酶质紧密结合（Step 1），获取Protein A 或Protein G 包被的磁珠以不变抗原-的阶段目标淀粉酶质组合物（Step 2）并洗掉不需求的相关材料（Step 3）。普通IP中的最后的关键步骤一般来说以及操作加温和还原故宫场景/性变剂使淀粉酶质性变（Step 4）。 

当洗脱的IP样品通过SDS-PAGE分离（Step 5），后续Western blot中使用的相同一抗进行检测，然后分别使用常规二抗和TrueBlotTM二抗检测时，结果表面：使用常规二抗检测时，捕获抗体的重链和轻链都可以检测到（Step 5 右图），这可能会掩盖您感兴趣的蛋白，特别是如果它的大小与IgG重链或轻链相近时，使用TrueBlotTM二抗检测时，只检测到特异性的目的蛋白（Step 5 左图）。

TrueBlotTM.jpg

用anti Mouse IgG TrueBlotTM检测结果用以往的HRP符号anti-Mouse IgG二抗进行查测结杲
 

由结果可知：用传统的HRP标记二抗检测时会出现轻链和重链条带，而用TrueBlotTM二抗检测时则没有，表明TrueBlot?𒁃二抗仅识别天然（非还原）状态的一抗，消除重链和轻链条带的干扰，以为免疫沉淀样品提供准确、出版质量的WB结果。

 

  1. 荧光标记TrueBlot二抗：

Fluorescent TrueBlot一款模块強大、非特异朋友高的欧宝体育官方 ，可与近红外颜料答配施用。

Fluorescent-TrueBlot.png

Fluorescent TrueBlot?:Anti-Rabbit IgG DyLight? 680的western blo结果：
Lane 1: Rabbit IgG, 非变性.
M: Marker.
Lane 2: Rabbit IgG, 变性.
 

  1. TrueBlotTM系列微球

TrueBlot-IP.png

Mouse TrueBlot IP琼脂糖珠VS传统IP磁珠
 

TrueBlot欧宝体育官方 特点：

1、根本确诊的免疫性积淀用一抗重轻链的要素，最后清楚、准确的，特情人强；

2、使用简单，仅将传统的二抗替换成TrueBlotTM系列二抗即可。

注意要点：

1、需对免疫性沉淀物中物来进行恢复原状完美重现；2、免疫细胞印刷痕迹时应用有机牛奶最为全外移式液，而不能带BSA(牛血清廉蛋白酶)，因此前者的全外移式角色不高；

3、当用Rabbit IgG TrueBlotTM对免疫印迹膜进行检测时ꦿ，要先用anti-IgG微球来进行免疫沉淀步骤，而不能使用Protein A或Protein G微球，因为后者与Rabbit IgG有很强的亲合力，会引起污染。

 

TrueBlot系列欧宝体育官方 推荐：

类别货号欧宝体育官方 名称规格
免疫沉淀后WB用抗体RKL-18-8817-30Mouse TrueBlot ULTRA: Anti-Mouse Ig HRP20uL
RKL-18-8817-31Mouse TrueBlot ULTRA: Anti-Mouse Ig HRP50uL
RKL-18-8817-33Mouse TrueBlot ULTRA: Anti-Mouse Ig HRP200uL
RKL-18-8816-31Rabbit TrueBlot ULTRA: Anti-Rabbit Ig HRP50uL
RKL-18-8816-33Rabbit TrueBlot ULTRA: Anti-Rabbit Ig HRP200uL
RKL-18-8814-31Goat TrueBlot ULTRA: Anti-Goat Ig HRP50uL
RKL-18-8814-33Goat TrueBlot ULTRA: Anti-Goat Ig HRP200uL
RKL-18-0217-32Fluorescent TrueBlot Anti-Mouse Fluorescein100uL
RKL-18-4417-32Fluorescent TrueBlot Anti-Mouse DyLight 680100uL
RKL-18-4517-32Flourescent TrueBlot Anti-Mouse DyLight 800100uL
RKL-18-0216-32Fluorescent TrueBlot Anti-Rabbit Fluorescein100uL
RKL-18-4416-32Fluorescent TrueBlot Anti-Rabbit DyLight 680100uL
RKL-18-4516-32Fluorescent TrueBlot Anti-Rabbit DyLight 800100uL
IP用微球(琼脂糖珠/磁珠）RKL-00-8811-25TrueBlot Anti-Mouse Ig IP Agarose Beads2.5uL
RKL-00-8800-25TrueBlot Anti-Rabbit Ig IP Agarose Beads2.5uL
RKL-00-8844-25TrueBlot Anti-Goat Ig IP Agarose Beads2.5uL
RKL-00-1811-20TrueBlot Anti-Mouse IgG Magnetic Beads2uL
RKL-00-1811-50TrueBlot Anti-Mouse IgG Magnetic Beads5uL
RKL-PA00-18-2TrueBlot Protein A Magnetic Beads2mL
RKL-PA00-18-5TrueBlot Protein A Magnetic Beads5mL
RKL-PG00-18-2TrueBlot Protein G Magnetic Beads2mL
RKL-PG00-18-5TrueBlot Protein G Magnetic Beads5mL
RKL-S000-18-2TrueBlot Streptavidin Magnetic Beads2mL
RKL-S000-18-5TrueBlot Streptavidin Magnetic Beads5mL
RKL-B000-18-2TrueBlot Biotin Magnetic Beads2mL
RKL-B000-18-5TrueBlot Biotin Magnetic Beads5mL
RKL-TMS-06TrueBlot Anti-Goat Ig IP Agarose Beads6 tests
RKL-88-7788-31Mouse TrueBlot Set (IP Agarose Beads)50uL
RKL-88-1688-31Rabbit TrueBlot Set (IP Agarose Beads)50uL
RKL-88-1488-31Goat TrueBlot Set (IP Agarose Beads)50uL
IP及其后WB检测用试剂盒RKL-88-8887-31Mouse TrueBlot Western Blot Kit50uL
RKL-88-8886-31Rabbit TrueBlot Western Blot Kit50uL
RKL-88-8884-31Goat TrueBlot Western Blot Kit50uL
RKL-88-8887-215IP & WB Kit for GFP Epitope Tag1 Kit
RKL-88-8887-382IP & WB Kit for 6X HIS Epitope Tag1 Kit
RKL-88-8887-383IP & WB Kit for DYKDDDDK (FLAG) Epitope Kit1 Kit
RKL-KBA-PA00-18TrueBlot Protein A Magnetic Beads IP/Co-IP Kit20 tests
RKL-KBA-PG00-18TrueBlot Protein G Magnetic Beads IP/Co-IP Kit20 tests

*上述欧宝体育官方 仅限用于科研学术研究用途，不得用于医疗与诊断。

 

如何做好IP/Co-IP实验，TrueBlot欧宝体育官方 选择指南：

TrueBlot-1.jpg

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