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基因克隆技术

发布者：欧宝体育官方 科技    发布时间：2021-07-07     
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基因克隆技术是分子生物学的核心技术，分子克隆指的是在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子，构成遗传物质的新组合，使之进入宿ꦜ主细胞内并获得持续稳定增殖能力和表达。基因克隆技术的发展经历3个阶段：

首位时候为原素的T4 DNA相连接酶介导的TA克隆及粘度尾端克隆；其二的阶段为根据DNA表达酶的LIC系列作品克隆；第三方价段为依据DNA重组方案酶的Gateway克隆及两步法克隆。


1、即用型表达克隆，构建表达载体所用的酶以及中间载体

供给140,000个预制板即用型Nextday-ORF 克隆。不需再等上数日/几星期就可已经实行染色体表答爱或蛋清表答爱实验英文。每条个Nextday-ORF?克隆均路经回文序列核实，隔日邮递，且四种宏病毒有哪些、非宏病毒有哪些类媒介可选装。


详情查看：1、一步到位or从头开始，GeneCopoeia基因克隆满足你所有想象


2、转染试剂

受损受损神经元系转染是以将外源DNA如DNA，RNA等接入受损受损神经元系内的某种技术水平。跟据辅乳期植物受损受损神经元系蛋白酶理解具体步骤，受损受损神经元系培植顺利完成后需进行受损受损神经元系转染，跟据有差异于的实验室目地必选择有差异于的转染技巧。当前，通用的受损受损神经元系转染技巧大部分分类三级有效途径：物理上的介导（电破孔法，DNA枪法、显微注入法）、物理化学介导（脂质体转染法、磷酸钙共乳浊液法、阳正离子汇聚物介导法）、生态学介导（病菌介导转染、安卓原生系统质体转染）。


详情查看：1、欧宝体育官方:GeneCopoeia转染试剂，攻坚克难：快、准、狠


3、构建表达载体

Gateway克隆水平设备看作种可迅猛、便捷将DNA编码序列转交到形式上的克隆的方法，Gateway水平设备忽略于下边描诉的2个表现：BP表现和LR表现，凭借BP表现得到开始学习上手克隆(时不时分欧宝体育官方 也说中部克隆)，再凭借LR表现将效果DNA以正確的趋势相连接到很多效果形式上，成型各种的描述形式。向大家分享BP表现-勾勒开始学习上手形式和LR表现-勾勒描述形式：


详情查看：1、欧宝体育官方:Gateway克隆技术高深莫测?


4、荧光素酶

荧光素酶（luciferase）是清新界里能够形成动物制品荧光的酶的总称。荧光素和荧光素酶某一动物制品闪光标准，就可以相当精确度、有效率地检查测量染色体的抒发，是检查测量转录细胞与原因染色体运行子区DNA彼此功能的一些检查测量具体方法。另外要的介绍有：1、萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）；2、海肾荧光素酶（Renilla luciferase）；3、Gaussia 排出型荧光素酶；4、排出型酸性磷酸酶（secreted alkaline phos-phatase，SEAP）


详情查看：1、欧宝体育官方:神奇的荧光素酶（一），知否知否
详情查看：2、神奇的分泌型荧光素酶（二），知否知否


欧宝体育官方 推介： 

1、构建表达载体所用的酶以及中间载体


货号载体名称规格描述
RCBM-1001-020EZRecombinase LR Mix20次反应催化attL x attR重组反应，高效率酶，与Gateway 克隆技术完全兼容
欧宝体育官方:RCBM-1001-100100 次反应
欧宝体育官方:RCBM-1002-020EZRecombinase BP Mix20次反应催化attB x attP重组反应，高效率酶，与Gateway?克隆技术完全兼容
欧宝体育官方:RCBM-1002-100100 次反应
货号载体名称规格类型
EZ001pEZ-Lv19910ug慢病毒表达载体
EZ003pEZ-Lv23310ug
EZ004pEZ-Lv19510ug
EZ006pEZ-Lv20110ug
EZ007pEZ-M0210ug哺乳动物细胞表达载体
EZ008pEZ-M1310ug
EZ009pEZ-M6710ug
EZ010pEZ-M6810ug
EZ011pEZ-M9810ug
EZ012pEZ-SH0110ugHuman Safe Harbor载体
EZ013pEZ-SH0210ugMouse Safe Harbor载体
EZ014pEZ-B0110ug大肠杆菌表达载体
EZ015pEZ-B0210ug
EZ016pEZ-Lv23510ug慢病毒表达载体
EZ017pEZ-Lv23610ug
EZ018pEZ-Lv23710ug
EZ019pEZ-Lv23810ug
EZ021pEZ-P00210ug植物表达载体
EZ023pEZ-P00410ug
EZ026pEZ-P00710ug
EZ027pEZ-P00810ug
EZ029pEZ-P01010ug
EZ030pEZ-P01110ug
EZ031pEZ-P01210ug
EZ032pEZ-P01310ug
EZ033pEZ-M0610ug哺乳动物细胞表达载体
EZ034pEZ-M0910ug
EZ035pEZ-M1210ug
EG001pShuttle-D0110ug穿梭载体
EG002pShuttle-D0210ug
2、转染免疫试剂
货号明称使用性

EF003

EndoFectin? Max转染化学试剂 (1 mL)很广适可以用在于好几种上皮细胞

EF004

EndoFectin? Max转染微生物培养基 (3 mL)

EF015

CRISPR-Fectin? 转染实验试剂 (1 mL)优化系统的CRISPR-Cas9核核蛋白常用的转染化学试剂。可与匹配在使用

EF015

EF016

EF007

EndoFectin? Expi293 转染采血管 (1 mL)悉心转染悬屏细胞膜293F,转染生产率最高

EF009

EndoFectin? Expi293 提高转染化学试剂盒 (1L 转染使用量)

EF010

EndoFectin? Expi293 提升转染化学试剂盒 (10L 转染需求量)

EF005

EndoFectin? HepG2 转染采血管 (1 mL)为惯用组织细胞系HepG2进行优化方案设计构思

EF006

EndoFectin? HepG2 转染采血管 (3 mL)

EF001

EndoFectin? Lenti转染免疫试剂 (1 ml)转染293T神经元，可回报越来越高滴度的慢木马

EF002

EndoFectin? Lenti转染化学药品 (3 ml))


 3、BP体现-搭建基础学习承载和LR体现-搭建把你想表达出来承载


货号名称说明
欧宝体育官方:RCBM-1002-020EZRecombinase? BP Cloning Kit (20 rxn)Catalyzes attB x attP cloning（催化BP反应）
欧宝体育官方:RCBM-1002-100EZRecombinase? BP Cloning Kit (100 rxn)Catalyzes attB x attP cloning（催化BP反应）
欧宝体育官方:RCBM-1001-020EZRecombinase? LR Cloning Kit (20 rxn)Catalyzes attL x attR cloning（催化LR反应）
欧宝体育官方:RCBM-1001-100EZRecombinase? LR Cloning Kit (100 rxn)Catalyzes attL x attR cloning（催化LR反应）


4、荧光素酶 
货号欧宝体育官方 名称欧宝体育官方 特性荧光素酶规格
Luc-Pair? Duo-Luciferase Assay Kit 2.0 Hot !稳定型萤火虫（Fluc）
海肾（Rluc）		100rxns
300rxns
1000rxns
LF004Luc-Pair? Duo-Luciferase HS Assay Kit Hot !高灵敏型萤火虫（Fluc）
海肾（Rluc）		100rxns
LF005300rxns
LF0061000rxns
LF007Luc-Pair? Firefly Luciferase HS Assay Kits高灵敏型萤火虫（Fluc)100rxns
LF008300rxns
LF0091000rxns
LF010Luc-Pair? Renilla Luciferase HS Assay Kit高灵敏型海肾（Rluc）100rxns
LF011300rxns
LF0121000rxns
LF013Luc-Pair? Duo-Luciferase HT Assay Kit稳定型， 无需预先裂解细胞，适用高通量分析萤火虫（Fluc）
海肾（Rluc）		10mL
LF01430mL
LF015100mL
LF016Luc-Pair ? Firefly Luciferase HT Assay Kit稳定型， 无需预先裂解细胞，适用高通量分析萤火虫（Fluc）10mL
LF01730mL
LF018100mL
LF019Luc-Pair? Renilla Luciferase HT Assay Kit稳定型， 无需预先裂解细胞，适用高通量分析海肾（Rluc）10mL
LF02030mL
LF021100mL
荧光素酶意见书DNA膜蛋白：
货号欧宝体育官方 启动子报告基因示踪基因筛选标记抗性研究
ZX001pEZX-FR01(10?g)N/A*Firefly
(hLuc)		Renilla
(Rluc)		PuromycinKanamycin常规启动子等研究
ZX002pEZX-FR02(10?g)SV40Firefly
(hLuc)		Renilla
(Rluc)		N/A*AmpicillinUTR靶标等研究
ZX003pEZX-FR03(10?g)miniCMVFirefly(
hLuc)		Renilla
(RLuc)		PuromycinKanamycin转录因子结合位点等研究
货号名称规格欧宝体育官方 特性
Secrete-PairTM Dual Luminescence Assay Kit100rxns无需破碎细胞，吸取上清；检测Gluc 和SEAP酶活性
300rxns
 代谢型单荧光素酶检则化学制剂盒
货号名称规格欧宝体育官方 特性
LF061Secrete-PairTM Gaussia Luciferase Assay Kit100rxns无需破碎细胞，吸取上清；检测Gluc的酶活性
LF0621000rxns
 荧光素酶统计DNA媒介：
货号欧宝体育官方 描述规格
ZX101pEZX-GN01pEZX-GN01 包含Gluc和SEAP的报告载体10?g
ZX102pEZX-GN03pEZX-GN03 包含Gluc和SEAP的报告载体10?g
ZX103pEZX-GA01pEZX-GA01 包含Gluc和SEAP的报告载体10?g
ZX104pEZX-GA02pEZX-GA02 包含Gluc和SEAP的报告载体10?g
ZX105pEZX-GA03pEZX-GA03 包含Gluc和SEAP的报告载体10?g
ZX106pEZX-LvGN01pEZX-LvGN01 包含Gluc和SEAP的报告载体 (lentiviral)10?g
ZX107pEZX-LvGA01pEZX-LvGA01 包含Gluc和SEAP的报告载体 (lentiviral)10?g


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