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一步到位or从头开始,GeneCopoeia基因克隆满足你所有想象

发布者:欧宝体育官方 科技    发布时间:2019-12-03     
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与PCR、qPCR等水平应用一致,为大大碳原子实验设计室需备的方法,大大碳原子克隆水平应用被多应用于多元的基因组的功能深入分析。何谓大大碳原子克隆指的是在身体外将核酸大大碳原子放入类病毒、质粒或别的各种载体大大碳原子,产生基因遗传类物质的新整合,使之开始快穿之女主生殖细胞内并拥有持续性稳定可靠分裂繁殖力量和展示。


基因克隆


        遗传基因克隆技能的开发体验3个关键时期,第1 关键时期为经典英文的T4 DNA接触酶介导的TA克隆及磁性后部克隆,第三点关键时期为应用于DNA表达酶的LIC编克隆,第三点关键时期为应用于DNA整顿酶的Gateway克隆及的一步法克隆。


  • 基于T4 DNA连接酶的克隆


        本题材克隆安全使用的酶类为:T4 DNA联系酶。               *  局限性性内切酶:应该对的目的电影片段和膜蛋白辨识并切除出一模一样的黏性下端,使用碱基相互依存联接。              *  T4 DNA拼接酶:就可以促使效果片断和媒体后以为碱基上的5’磷酸基团和3’羟基建成磷酸二酯键,以实行将效果片断和媒体拼接成环状质粒。         选择需不需要适用局限性内切酶,可划分成平端部克隆/TA克隆和黏力端部克隆。


T4 DNA连接酶


  • 基于DNA修饰酶的克隆方法


        本全系列克隆便用的酶类为:T4 DNA缔合酶         T4  DNA配位缩聚酶还具有3'→5'核酸外切酶吸附性和5'→3'  DNA配位缩聚酶吸附性。较弱dNTP时,情况为3'→5'核酸外切酶吸附性,切工目地人类基因遗传和媒体,呈现单链的DNA黏力未端;加如某些一个人dNTP,3'→5'核酸外切酶吸附性和5'→3'  DNA配位缩聚酶吸附性均衡性点,掺量与切工gif动态均衡性点,切工暂停。如此,T4 DNA配位缩聚酶为根本的克隆方式方法的的关键是目地人类基因遗传和媒体间想要很多定数量的交叠回文序列。


T4 DNA聚合酶克隆过程


  • 基于重组酶的克隆方法


——本系列的克隆食用的酶类为:λ合并酶Int、λ割除酶Xis、直肠杆菌IHF因素。         该技术性要有六个炎症因子聊天从组位点(attB、aatP、attL、attR),牵引发现3个炎症因子聊天从组发现影响(BP发现影响和LR发现影响)。BP发现影响:将目地染色体组克隆加入进门学习质粒。选用到的酶为Int和IHF。LR发现影响:将进门学习质粒中的目地染色体组转入到终媒介中,可获得理解媒介。选用到的酶为Int、IHF及Xis。理解媒介若帶有attR位点,则帶有attL位点的进门学习克隆便可与之发现LR发现影响,继而将进门学习克隆的目地染色体组转入到各个型的理解媒介中。


基于重组酶的克隆方法


        能够 之内的方式克隆的什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组也只有能够 展示能力探索性和设计什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组的功用与什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组展示政策调控的基理,克隆什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组展示出所商品编号的核胆固醇可供作结构的与功用的设计。一些具备指定区域生态学活性酶类的核胆固醇在中医学上、乃至在企业上是很有利用的价值的,行克隆其什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组使之在快穿之女主細胞在大中城市量展示而刷快。而要使克隆什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组在快穿之女主細胞中展示,就需要将它放进有什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组展示想要要的一些元器件封装的质粒质粒中,形成了展示克隆。此时错综复杂且的周期长,GeneCopoeia可给出很多多元智能的。一种即用型即用型展示克隆是将设计什么是人类遗传遗传遗传表观遗传组的ORF装在有不一样核胆固醇价签的展示质粒质粒中,可会直接用做机体或离体不一样快穿之女主或展示机系统的核胆固醇展示和功用设计,得节约了研究员耗用在亚克隆步骤之一上的大规模人力和时段。


传统克隆制备流程

即用型表达克隆

即用型表达克隆


        现有GeneCopoeia可具备140,000个预制件。不能不再等上数日/数日只能已经开始染色体表述或蛋白质表述实验设计。每条个Nextday-ORF™克隆均途经回文序列安全验证,隔日邮递,且很多艾滋病毒样本、非艾滋病毒样本类各种载体可以选择。


:

  1. 肠道杆菌表示克隆形式  (15 种)
  2. 乳期组织细胞表达爱克隆质粒载体  (48种)
  3. 慢疫情把你想表达出来克隆的载体  (82种)
  4. 酵母菌表述克隆平台 (3 种)
  5. 蜂类人体细胞描述克隆媒介  (1 种)
  6. 麦胚无肿瘤细胞表明克隆各种载体  (8 种)


        不但可不可以间接出示即用型抒发爱克隆,GeneCopoeia也可出示建设抒发爱媒体所有的酶相应里面媒体:


货号载体名称规格描述
RCBM-1001-020
EZRecombinase™ LR Mix20次反应催化attL x attR重组反应,高效率酶,与Gateway®克隆技术完全兼容
欧宝体育官方:RCBM-1001-100
100 次反应
RCBM-1002-020
EZRecombinase™ BP Mix20次反应催化attB x attP重组反应,高效率酶,与Gateway®克隆技术完全兼容
RCBM-1002-100
100 次反应


货号载体名称规格类型
EZ001
pEZ-Lv19910ug慢病毒表达载体
EZ003
pEZ-Lv23310ug
EZ004
pEZ-Lv19510ug
EZ006
pEZ-Lv20110ug
EZ007
pEZ-M0210ug哺乳动物细胞表达载体
EZ008
pEZ-M1310ug
EZ009
pEZ-M6710ug
EZ010
pEZ-M6810ug
EZ011
pEZ-M9810ug
EZ012
pEZ-SH0110ugHuman Safe Harbor载体
EZ013
pEZ-SH0210ugMouse Safe Harbor载体
EZ014
pEZ-B0110ug大肠杆菌表达载体
EZ015
pEZ-B0210ug
EZ016
pEZ-Lv23510ug慢病毒表达载体
EZ017
pEZ-Lv23610ug
EZ018
pEZ-Lv23710ug
EZ019
pEZ-Lv23810ug
EZ021
pEZ-P00210ug植物表达载体
EZ023
pEZ-P00410ug
EZ026
pEZ-P00710ug
EZ027
pEZ-P00810ug
EZ029
pEZ-P01010ug
EZ030
pEZ-P01110ug
EZ031
pEZ-P01210ug
EZ032
pEZ-P01310ug
EZ033
pEZ-M0610ug哺乳动物细胞表达载体
EZ034
pEZ-M0910ug
EZ035
pEZ-M1210ug
EG001
pShuttle-D0110ug穿梭载体
EG002
pShuttle-D0210ug

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