在好多海洋植物学用中,欧宝体育官方 需用对进样器的双链DNA(dsDNA)做参考值 举例说明:cDNA文库搭建、亚克隆的DNA细节描写的纯化、参考值DNA增加副产物在药物剂量分子式种的余留等。标准检侧核酸氧化还原电位的的方法是吸光度法,即检侧核酸在260nm ( A260 )处的光消化,吸光度法的利与弊是范本中的单链核苷酸和的核苷酸会呈现影向信息,样品英文中的沉渣也会影向成果。吸光法没有鉴别DNA和RNA, 灵巧度也相应来说较低(用1cm的比色杯在A260数值为0.1时相应来说应的双链DNA氧化还原电位为5ug/ml )。前情回顾:核酸定量哪家强?荧光探针VS分光光度法
今天给大家带来一款荧光法双链DNA检测工具—Pico488 dsDNA 定量试剂盒(货号:B1102),还有分开的Pico488 dsDNA 一定量化学药品(货号:42010),Pico488是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,🎀DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
Pico488仅在与DNA双链运用后才长出荧光,且生产生的荧光与DNA酸度呈正比,在存在的ssDNA、RNA和缩聚反应核苷酸的條件下,也行确定性地检测低至pg阶段的dsDNA。该具体分析在多条用户级条件内呈线性网络,且行说无章列根据性,也行精准度地检测多条源于的DNA,涉及到基因组组DNA、病毒码DNA、极少量抽取DNA或PCR增加终产物,要用荧光分光光度计或荧光酶标仪读数,Ex/Em=503nm/525nm。Pico488 dsDNA 定量试剂盒(货号:B1102) |
Pico488 dsDNA定量试剂(货号:42010) |
欧宝体育官方 优势:
比较中国传统的办法,如UV紫外线吸光法(A260)、电极改良品种法、Hoechst 33258颜料法等,Pico488 dsDNA 化学发光法兼备低于优越:①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,检测范围为:1pg/ul–5ng/ul,可节省宝贵的样品;
②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
③耐受性好:耐受🌌较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA;
④易于使用:只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于24和96孔板;与市面上的大多数𒁃荧光酶标仪和荧光计兼容;
⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复𓃲杂混合物中dsDNA的检测和病毒DN🃏A定量等多种领域。
欧宝体育官方 应用:
校正少量的DNA使用量(如役苗生產);对DNA备样展开正确定量分析适用检测设备及建议上样量:
检测设备类型 | 测定体积 | Pico488染料工作液体积 | DNA样本量 | |
比色皿荧光计 | 标准荧光比色皿 (3.5 mL) | 2 ml | 1 ml | 1 ml |
其他荧光比色皿 | 比色皿体积75% | 比色皿体积的37.5% | 比色皿体积的37.5% | |
平板荧光计 | 96 孔板,每孔 | 0.2 ml | 0.1 ml | 0.1 ml |
24 孔板,每孔 | 1 ml | 0.5 ml | 0.5 ml | |
其他规格的板子 | 孔体积的75% | 孔体积的75% | 孔体积的75% | |
NanoDrop 3300* | 0.1 ml | 0.05 ml | 0.05 ml |
检测结果展示:
Pico488光谱信息 |
Pico488染料特异性针对于dsDNA |
试剂盒标准曲线 |
引用文献赏析
1.Caza, F.; Granger Joly de Boissel, P.; Villemur, R.; Betoulle, S.; St-Pierre, Y. Liquid biopsies for omics-based analysis in sentinel mussels. PLoS One, 2019, 14(10), e0223525. doi:
2.Crupi, A.N.; Nunnelee, J.S.; Taylor, D.J.; Thomas, A.; Vit, J.-P.; Riera, C.E.; Gottlieb, R.A.; Goodridge, H.S. Oxidative muscles have better mitochondrial homeostasis than glycolytic muscles throughout life and maintain mitochondrial function during aging. Aging, 2018, 10(11), 3327–3352. doi:
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