自噬(autophagy)是在真核人体受损细胞膜核膜中,咖啡因中毒或异常处理的人体受损细胞膜核膜器被双膜泡隔离防晒开并交楼给溶酶体/液泡后被溶解,收回通过人体受损细胞膜核膜性材料及清理掉退化人体受损细胞膜核膜器或威害的蛋清质的步骤。自噬的步骤涉及到隔离防晒开膜(isolation membrane)或自噬前体(pre-autophagosome)的形成了了了及不断延展、自噬体(autophagosome)的形成了了了、自噬体和溶酶体相结合后形成了了了自噬溶酶体(autolysosome),终于胞内材料溶解,发生的溶解货物如酪氨酸、乳酸酸等可被人体受损细胞膜核膜再通过。
自噬在持续生殖神经元内恒定树立为重要的生命科学学角色:①应该对外源性条件刺激,主观能动性光化学降解立即收获植物生长所要营养成分欧宝体育官方
。②生殖神经元自我认知提升,光化学降解胞内显老淀粉酶和生殖神经元器后立即提炼淀粉酶和生殖神经元器。③减伤性清理胞内损失脂溶性结构欧宝体育官方
,持续生殖神经元普通 基本功能。 即使自噬对恢复组织恒定即使最重要,这样,自噬查测怎末做呢?说到这个就不可以不谈到全球公认的自噬圆形标志物——微管重要性球蛋白1的轻链3(microtubule-associated-proteinlight-chain-3,LC3)。很正常实际情况下,LC3以未脂化的可可溶性方法出现于胞浆中,被誉为LC3-Ⅰ,其原子核量为18kDa。自噬建成时,LC3-Ⅰ酶解变为成了膜型LC3,又被誉为LC3-Ⅱ,其原子核量为16kDa。LC3Ⅱ在聚丙稀酰胺妇科凝胶上成绩出的变更率大于LC3-Ⅰ,LC3-Ⅱ与噬小体/自噬溶酶体的数目呈正重要性,那么LC3-Ⅱ被多地应用软件于化学发光法组织自噬的几丁质酶。
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货号 | CBA-5115 |
名称 | Autophagy Immunoblot Kit (LC3-II Detection) 自噬免疫印迹试剂盒(LC3-II 检测) |
检测方法 | WB |
结果图 | 泳道 2:HeLa 对照裂解液(未去除胞质 LC3) 泳道 3:氯喹处理的HeLa 裂解液(未去除胞质 LC3) 泳道 4:HeLa 对照裂解物(去除胞质 LC3) 泳道 5:氯喹处理的HeLa 裂解液(去除胞质 LC3) |
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货号 | CBA-5116 |
名称 | Autophagy ELISA Kit (LC3-II Quantitation) 自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量) |
检测方法 | ELISA(检测细胞裂解液) |
结果图 | |
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货号 | CBA-5117 |
名称 | Cellular Autophagy ELISA Kit (LC3-II Quantitation) 细胞自噬ELISA检测试剂盒(LC3-II定量) |
检测方法 | 基于细胞的ELISA |
结果图 | |
LC3与有机荧光淀粉酶(GFP)组合成LC3-GFP表明出与LC3同一的的过程 ,然而可完成监控器液泡气力输送机和GFP-LC3之后的被分解转换成而示踪自噬通量。当自噬通量一切正常,来源于于自噬休内部的GFP-LC3在自噬体膜溶化且曝露于液沏电离酶的知识物被裂解。GFP-LC3的淀粉酶电离可释散出来出一完美的GFP位置,甚为对可降解有对应抗性,用于为自噬有机物积累在液泡。什么是自由的GFP水平方向增大可被验测且可完成Western痕印剖析确定化学发光法,并与自噬率相关联。GFP是酸比较敏感型GFP淀粉酶,可能自噬溶酶休内部的弱酸性环保,就都可以造成的pH减低、GFP淬灭,故此,GFP的强与弱可标识自噬溶酶形体成的能顺利系数。不光以内LC3-II验测制剂盒,Cell Biolabs肯定还就都可以具备GFP-LC3形容质粒(cat#CBA-401):
左侧是pCMV-GFP对照质粒;右侧是pCMV-GFP-LC3表达质粒
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