DNA甲基化是在DNA甲基化传递酶(DNA methytransferase,DNMT)的的作用下,在dnaDNA回文序列CpG二核苷酸的胞嘧啶5’-碳位共价搭配一两个甲基基团而形成了5mC。5hmC是5mC的羟基化样式,1952年在噬菌体DNA中头次察觉了。探索察觉了5hmC是10-11易位(ten-eleven translocation,TET)宗族球蛋白使用硫化5mC行成的,进三步可被硫化为5fC和5caC。
与5mC相较,5hmC的成分更低,但5hmC也存在非常的非常关键的微海洋生物制品性能,探究认为,5hmC参与到了染色体表达方式的转录控制,并在DNA去甲基化的时候中起到非常关键能力。最后,5hmC应该与某一淋巴癌肿的会出现关系密切涉及到的,有应该拥有淋巴癌肿最早期临床诊断的微海洋生物制品标志牌物。因而熟练5hmC在染色体组DNA中的降钙素原的检测和定位功能数据信息是非曲直常的这个必要的。但探究一开始却受到着庞大的技術挑衅:另一个说的是方向是毕竟标的微海洋生物制品无机化学形式不忍易差别5mC和5hmC;另另一个说的是方向是伴随哺乳期间家禽染色体组中的胞嘧啶衍微海洋生物制品在胞嘧啶下列占的此例很低,因而精确度的检测其成分极其难点。
货号 | 名称 | 规格 |
P-1067 | 5mC & 5hmC测试PCR化学试剂盒BisulPlus Loci 5mC & 5hmC Detection PCR Kit | 2*24reaction
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传统式的DNA甲基化非特异朋友淡化位点的检验分析常见是确认重亚浓盐酸钠盐发应,将内含淡化位点的编码编码队列变为为合适DNA编码编码队列的期间。首选,对于测DNA来进行重亚浓盐酸钠盐整理,未甲基化胞嘧啶(C)变为为尿嘧啶(U),PCR测序后变为为胸腺嘧啶(T),而甲基化C不再次发生波动。确认与未整理DNA的编码编码队列来进行校验,也可以如何判断DNA的甲基化位点及涵盖地步。但一些做法步骤没法差别5mC和5hmC,在重亚浓盐酸钠盐淡化期间中,甲基化的C涵盖5mC和5hmC,均始终维持发生变化,确认一些做法步骤到的大家比较熟悉5mC但是是5mC与5hmC的集,在事后的检验做法步骤中也始终无法设别同一律。 Epigentek新开发了了套經過验正的BisulPlus Loci 5mC & 5hmC Detection PCR Kit, 可检验并检测工具5hmC和5mC。此实验试剂盒的操作操作简单,只需五步: 独一步一个脚印:重亚磷酸盐生成待测DNA,未甲基化C生成为U,PCRPCR扩增后生成为T,5mC始终不变,5hmC被生成为5-亚甲基磺酸胞嘧啶(CMS) 2、步: APOBEC脱氨酶促使亚硝酸钠盐图片转换后的DNA,将5mC图片转换为T,而CMS相同,PCRPCR扩增后仍为C。
3、步:用qPCR深入分析是比较外理和未外理的DNA队列,实现目标对DNA 5mC&5hmC甲基化的酶联免疫法和标记加测。
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特点】
- 另外测量:5hmC和5mC经DNA转变成整理后,完成qPCR提高持平鉴别的效果
- 策略新颖别致:亚浓盐酸氢盐紧密结合胞嘧啶脱氨酶(APOBEC)转变成5mC,以完成鉴定结论5hmC的为的
- 高特女性朋友:5hmC除过都可以不同之处于5fC和5caC,也可与C和5mC分清开
- 体现灵便:可也分别为确定5hmC和5mC各24次认定体现,或仅5mC 48次体现
- 进行方便:可在5个钟头内搞定
- 变为率高:C- U变为率> 99%,5mC-T变为率> 95%
- 样板适用于性广:起讫建筑材料应该要到繁多组织化/神经元样板中分发型离的染色体组DNA
Epigentek(美国)公司成立于2005年,是全球领先的表观遗传学研究相关欧宝体育官方
的开发商和供应商。公司开发的综合欧宝体育官方
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作为Epigentek的中国区域代理,将为客户提供完整的表观遗传解决方案,欧宝体育官方
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