细胞外囊泡(EV)染色试第一弹:欧宝体育官方:ExoBrite 细胞外囊泡(EV)染色试剂盒。
细胞外囊泡(EV)染色试第一弹:EXOBRITE CTB EV染色试剂盒
1.Exobrite流式抗体偶联物:
经常用到的癌細胞外囊泡(EV)记号淀粉酶是CD9、CD63和CD81,它是四白淀粉酶家族式的成员国。固然专门针对这样淀粉酶质的表面抗原可利用商业服务厂家直销商可以获得,但不怎么有表面抗原被认可或应用以探测EV或外泌体。的设计并认可了应用以流式的的癌細胞术的ExoBrite Flow Antibody偶联物,在纯化和串珠结合实际的EV中带来清亮的无线信号和低底色的EV记号物。ExoBrite 同型剖析流式的的表面抗原已被得知不与人们的癌細胞中的任意靶标的发生症状,还与tetraspanin表面抗原拥有一模一样的同型。ExoBrite流式抗体的优势:
结果展示:
SEC纯化的A549衍生EVs用ExoBrite 650/665 CD9流式抗体染色(左),与缓冲液中的相同抗体相比,可以看到特异性染色(右),在APC通道中的CytoFLEX-LX流式细胞仪上检测到外泌体。 |
SEC纯化的MCF-7衍生EVs用ExoBrite 560/585 CD63流式抗体染色(左),与缓冲液中的相同抗体相比,可以看到特异性染色(右),在PE通道中的CytoFLEX-LX流式细胞仪上检测外泌体。 |
SEC纯化的MCF-7衍生EVs用ExoBrite 410/450 CD81流式抗体染色(左),与缓冲液中的相同抗体相比,可以看到特异性染色(右),在Pacific Blue通道中的CytoFLEX LX流式细胞仪上检测到外泌体。 |
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欧宝体育官方 名称 | 偶联物 | 检测通道 | 规格 | 货号 |
ExoBrite CD9 Flow Antibody | ExoBrite 410/450 ExoBrite 490/515 ExoBrite 560/585 ExoBrite R-PE | Pacific Blue FITC PE | 25 tests 100 tests | P003-410… P003-RPE |
ExoBrite CD63 Flow Antibody | P004-410… P004-RPE | |||
ExoBrite CD81 Flow Antibody | P005-410… P005-RPE | |||
ExoBrite IgG1 Isotype Control Flow Antibody | P008-410… P008-RPE |
2.ExoBrite亲和素磁珠:
选用ExoBrite Streptavidin磁珠优化EV和外泌体拆分工做步凑,与同种欧宝体育官方 不同于,该磁珠可提高更低的后台和更大的EV阻止敏感度。这链霉亲和素包被和磁块聚苯乙稀珠(的直径4.5um)可以用于从内部培植基或其他的生物学液体中拆分EV,而不可過夜沉淀物中步凑。ExoBrite 亲和素磁珠的优点:
结果展示:
首先将ExoBrite 链霉亲和素磁珠与(橙色点)或不与(灰色点)生物素化的CD9抗体一起孵育,然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite 560/585 CTB EV染色,并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 | 首先将ExoBrite 链霉亲和素磁珠与(橙色点)或不与(灰色点)生物素化的CD63抗体一起孵育,然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。结合的EV被ExoBrite 560/585 CTB EV染色,并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 |
首先将ExoBrite 链霉亲和素磁珠与(橙色点)或不与(灰色点)生物素化的CD81抗体一起孵育,然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite 560/585 CD9流式抗体染色,并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 | 首先将ExoBrite 链霉亲和素磁珠与(橙色点)或不与(灰色点)生物素化的CD81抗体一起孵育,然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite 560/585 CTB EV染色,并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 |
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欧宝体育官方 名称 | 规格 | 货号 |
ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads | 5mL | 28000 |
3.ExoBrite超分辨率成像
因为外泌体和EVs的体积大概小和光电枝术体视光电技术高倍显微镜观察的签别率控制,经由三维成像来表现欧宝体育官方 确实都是个对战。超签别率体视光电技术高倍显微镜观察枝术,如会随机数光电枝术改造体视光电技术高倍显微镜观察(dSTORM),战胜了传统文化光电枝术体视光电技术高倍显微镜观察的衍射终极,不得对EVs等亚组织细胞成分去单分子式签别率。ExoBrite的优势 STORM CTB EV染色:
结果展示:
人类结直肠癌细胞系衍生EVs的超分辨dSTORM图像。EVs用抗tetraspanin抗体(抗CD9/CD63/CD81混合物,均与CF?647缀合,显示为品红色)和1X ExoBrite染色 560/585(青色)。使用ONI的EV Profiler试剂盒制备样品,并使用来自ONI(Oxford Nanoimaging, UK)的纳米成像仪s Mark II获取样品。使用ONI基于云的数据分析平台CODI的测试版来处理数据。比例尺为500 nm(缩小,左侧),单个EV面板为50 nm(右侧)。图片由ONI提供。 |
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欧宝体育官方 名称 | Ex/Em (nm) | 激光(s) (nm) | 检测通道 | 规格 | 货号 |
ExoBrite STORM CF?505 CTB EV Staining Kit | 505/519 | 488 | FITC | 100 Labelings | 30115-T |
500 Labelings | 30115 | ||||
ExoBrite STORM CF?583R CTB EV Staining Kit | 583/609 | 555 or 561 | Rhodamine or Texas Red? | 100 Labelings | 30116-T |
500 Labelings | 30116 | ||||
ExoBrite STORM CF?647 CTB EV Staining Kit | 652/668 | 633-640 | Cy?5 | 100 Labelings | 30117-T |
500 Labelings | 30117 | ||||
ExoBrite STORM CF?680 CTB EV Staining Kit | 681/698 | 633-640 | Cy?5.5 | 100 Labelings | 30118-T |
500 Labelings | 30118 |
4.Exobrite Western Blot抗体偶联物
ExoBrite 借助近红外荧光血清质印记认证了血清质免疫免疫抗原在EV导入物中给予光亮的讯号和低底色的EV标记符号物CD9、CD63和CD81。免疫免疫抗原有两个近红外荧光颜料ExoBrite 680/700和ExoBrite 770/800,其给予用无限流量卡比用于血清质印记的极具见到光发的颜料最大的信噪比。 ExoBrite Calnexin WB免疫免疫抗原可探测内质网中不产生的这种血清质。当作评述EV导入物溶解度的阴性反应较。ExoBrite WB抗体的优势:
结果展示:
用ExoBrite 680/700 CD9蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD9进行Western检测,显示CD9在EV制剂中富集。 | 用ExoBrite 680/700 CD63蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD63进行Western检测,显示CD63在EV制剂中富集。 |
用ExoBrite 680/700 CD81蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD81进行Western检测,显示EV制剂中CD81的富集。 | 用ExoBrite 770/800 calnexin WB抗体检测MCF-7细胞和EV裂解物中的人钙蛋白酶,显示EV制剂中缺乏calnexin。 |
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欧宝体育官方 名称 | 偶联物 | 规格 | 货号 |
ExoBrite CD9 Western Antibody | ExoBrite 680/700 ExoBrite 770/800 | 25 tests 100 tests | P003-680, P003-770 |
P004-680, P004-770 | |||
ExoBrite CD81 Western Antibody | P006-680, P006-770 | ||
ExoBrite Calnexin Western Antibody | ExoBrite 770/800 | P007-770 |
Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化欧宝体育官方 。其欧宝体育官方 被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利欧宝体育官方 众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen,以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。
近年来,Biotium现已其不少申请枝术授权许可给一部分首要的世界动物制品枝术平台,涉及到安捷伦、BD动物制品物理学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。 宝天动物制品高新现代科技(BTProbes)由芬兰知名度高口碑好荧光制剂装修公司Biotium平台于200七年在华揭牌,有的是家精益求精于动物制品荧光制剂科研的高高新现代科技装修公司,是多户欧美其它的国家装修公司长远销售商商,欧宝体育官方 被广软件于生命力物理学各级领域行业。近年来宝天可提供数据以上100款畅销的荧光蛋清(PE, APC),其它的荧光主料(FITC),代替PCR荧光主料(5-FAM,6-TAMRA)等。
当作Biotium在欧宝体育官方 的区代理商权,欧宝体育官方 科技开发有限制的子公司将为欧宝体育官方 玩家给出多方位的Biotium的欧宝体育官方 。
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