cGAS及cGAS-STING通路:
cGAS-STING卫星信号径路曾经是看作天然水免役性装置的一家很重要分为部份被显示,其作用是论文检测胞浆DNA的会显示,并在现象中触及发炎DNA的抒发。DNA一般会显示于肿瘤细胞核膜核中,非常处理在胞浆中市场定位的DNA与癌症的有或蠕虫病毒染病光于,环状GMP-AMP获得酶(cyclic GMP-AMP Synthasec,cGAS)感觉到本不可显示在肿瘤细胞核膜质的DNA时,会离子液体GTP和ATP相互有检查是否现象并转成1种被通称环鸟腺苷酸(cvclic GMP-AMP cGAMP)的小氧团伙,该小氧团伙看作愚形免役性装置的信使,会进一部刺激免役性现象。因比,cGAS像就是一家暗锁警告灯器,cGAMP则是暗锁警告灯器形成的电卫星信号。cGAMP综合并刺激STING,再者是1种看作肿瘤细胞核膜对非常处理胞浆DNA予以免役性对答的首要酚类化合物的跨膜管接头血清,STING被刺激后随TBK1从内质网一起去转位至核周内体。TBK1激酶磷过酸并刺激干拢素调节器指数公式(IRFs)和NF-KB,再者引发Ⅰ型干拢素和另一免役性对答DNA。2013年发现cGAS后不久,自我DNA的异常激活被证明是导致衰弱甚至致命的自身免疫性疾病的基础,如系统性红斑狼疮(SLE)和Aicardi–Goutieres综合征(AGS)。动物模型中的敲除研究清楚地表明,抑制cGAS是一种有希望的治疗干预方法,使得cGAS成为近些年热门的先天免疫靶点的酶。这里给大家带来全球领先先导药物高通量筛选专家欧宝体育官方:BellBrook研发的cGAS抑制剂高通量筛选工具——Transcreener cGAMP cGAS检测试剂盒,可助力全球制药和生物技术公司、CRO和学术实验室加速药物发现。 𓆉
Transcreener cGAMP cGAS检测法通过测定生成的cGAMP来测定cGAS酶的活性。通过检测cGAMP输出,该方法提供了一种实时评估任何cGAMP产生酶活性的通用方法。Transcreener cGAMP检测技术使用了一种简单但高效的方法,包括cGAMP特异性抗体搭配远红荧光的示踪剂。反应中产生的cGAMP与示踪剂竞争,改变荧光特性并提供荧光读出。cGAS分析可用于荧光偏振(FP)和时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)两种方式进行检测~
荧光偏振(FP)法原理示意图 |
时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)法示意图 |
参考用途:
相关实验验证数据请参见:
Transcreener cGAMP cGAS试剂盒优势:
操作简便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~ |
出色的信号稳定性:24小时以上的信号依旧稳定性 |
欧宝体育官方 性能展示:
cGAS由双链DNA激活,需要ATP和GTP底物来生产cGAMP | cGAS和 cGAMP 线性 |
第一步轻松高通量筛选处化合物库 | 后续通过剂量反应确定抑制剂效力 |
cGAS被dsDNA激活 | ATP和GTP依赖 |
Transcreener cGAMP cGAS试剂盒组分:
组分 | 描述 |
cGAMP Antibody | 二核苷酸cGAMP特异的抗体。 |
Tracer | 荧光的变化可以在FP或TR-FRET中读取 |
Stop & Detect Buffer B, 10X | 一种可以用来终止酶反应的缓冲液,用于终点法读数 |
ATP | ATP可用于酶反应和标准曲线 |
GTP | GTP可用于酶反应和标准曲线 |
cGAMP | 标准品 |
Interferon Stimulatory DNA | ISD是一种45-bp的低聚物,用于激活cGAS酶 |
需要自备的试剂及仪器:
名称 | 描述 |
cGAS酶 | cGAS(欧宝体育官方:Cat# 2227)可以从欧宝体育官方 购买。 |
酶缓冲液 | 欧宝体育官方 通常使用含有20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35和1% DMSO(测试化合物的溶剂)的酶缓冲液,使用最适合你的酶条件的缓冲液。 |
检测用板子 | FP 格式:黑色板子,推荐康宁384孔板(Cat# 4514) TR-FRET格式:白色板子,推荐康宁384孔板(Cat #4513) 均可从欧宝体育官方 购买~ |
读板器 | 需要能检测荧光偏振或者TR-FRET的读板器 |
移液器 | 使用液体处理设备,可以精确分配亚微升体积到384孔板。 |
超纯水 | 一些去离子水系统被核酸酶污染,核酸酶可以降解核苷酸底物和产物,降低了检测性能。小心处理和使用超纯水可以消除这个潜在的问题 |
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类别 | 货号 | 名称 | 规格 |
荧光偏振法的试剂盒 | 3024-1K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well) | 1000 Assay |
3024-10K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well) | 10000 Assay | |
3024-100K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | 10X10000 Assay | |
TR-FRET法的试剂盒 | 3025-1K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well) | 1000 Assay |
3025-10K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10,000 Assay, 384 Well) | 10000 Assay | |
3025-100K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | 10X10000 Assay | |
cGAS酶 | 2227 | Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 ?g | 10 ?g |
2228 | Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human,?Full-Length,?100 ?g | 100 ?g | |
cGAS酶+试剂盒 | 3024-1K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme | 1000 Assay+20 ?g |
3024-10K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme | 10000 assay+200 ?g | |
欧宝体育官方:3025-1K-B | Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme | 1000 Assay+20 ?g | |
3025-10K-B | Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme | 10000 assay+200 ?g | |
3024-1K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme | 1000 Assay+20 ?g | |
黑色板子 | 2233 | Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays) | 3-Pack |
2229 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays) | 3-Pack | |
2230 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays) | 30-Pack | |
白色板子 | 2234 | Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays) | 3-Pack |
2231 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays) | 3-Pack | |
2232 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays) | 30-Pack |
Note:以下欧宝体育官方 仅在科学,无法在医疗管理及判断~
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