前情回顾：Biotium：微生物(细菌，真菌&酵母)荧光染色及活力检测全套工具 

欧宝体育官方 描述：

Biotium的Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live &aꩲmp; Dead Cells(30027)通过两个DNA探针DMAO和EthD-III对活细菌(绿色)和死细菌(红色)进行双色荧光染色。DMAO 是一种绿色荧光核酸染料，可对活细菌和死细菌进行染色。Ethidium Homodimer III (EthD-III) 是一种红色荧光核酸染料，可选择性地对细胞膜受损的死细菌进行染色。当用 DMAO 和 EthD-III 的混合物染色时，细胞膜完整的细菌会发出绿色荧光，而细胞膜受损的细菌会发出红色荧光。该试剂盒适用于荧光显微镜和流式细胞仪。检测原理是通用的，适用于大多数细菌类型。用于100次流式细胞检测或1000次显微镜检测。 

特征：

• 检查测量同时肿瘤神经元群中的活肿瘤神经元和死肿瘤神经元
• 简单的、高效的免洗复染
• 用到荧光显微镜或流式上皮细胞上皮细胞术

欧宝体育官方 推荐：

名称	货号	规格
Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Bacteria Live & Dead Cells 细菌活细胞和死细胞活力/细胞毒性检测试剂盒	30027	1000 assays

DMAO，5 mM 饱和溶液(2 x 100 uL) EthD-III，2 mM 液体(2 x 150 uL)  

1、储存和处理在4℃下避光储存，按推荐储存条件，欧宝体育官方 的稳定期限至少为收到日期后的2年。DMAO和EthD-III染料与核酸结合。

2、光谱特性DMAO：Ex/Em：503/530nm（与DNA共存时） 乙溴化二聚体III（EthD-III）：Ex/Em：53📖2/625nm*（与DNA共存时） *EthD-III在279nm处也有强烈的紫♈外吸收峰

3、分析方案

1）荧光显微镜染色方案

• 将活性染料存量悬浊液加温至室内温度，并振动结合。
• 凭借将1微升DMAO、2微升EthD-III和8微升150毫摩尔氯化钠（参照剖析关注重大事项＃2）搭配组合，制得100倍含量的复染稀硫酸。自由振荡以保障积极混合型喂养。 关注：通过需要，重量不错按基数修整。
• 在微离心式式管上，借助以10,000 x g离心式式两小时并避开上清液来回收大肠杆菌受损细胞。
• 可供选择：用150毫摩尔氯化钠洗涤剂血细胞一些，可以通过左右两移液屡次。
• 凭借以10,000 x g离心式五分并消除上清液来沉淀出的螨虫上皮细胞。
• 在150微摩尔氯化钠中重透明桌面肿瘤细胞100微升。
• 向100微升杆菌悬屏液中放入1微升染剂混物。
• 缓缓的混合型，并在闭光具体条件下常温孵育14一分钟。
• 将打样定制中的5微升转入到玻片上，涂上安全玻璃盖片，使用CoverGrip Coverslip Sealant（23005）或指甲盖油隔绝。
• 实现荧光显微镜对比记的细胞核展开显像。DMAO能够适用FITC滤光片组展开显像，EthD-III能够适用Texas Red?或Cy?3滤光片组展开显像。

2）流式细胞术染色方案

①. 安装上述内容荧光显微镜染料方式的方法①-⑧开始方法。 重视：欧宝体育官方 意见建议还制法仅用DMAO复染的死人体癌细胞和仅用EthD-III复染的死人体癌细胞的单染革兰氏阴性菌样品管理。 ②. 成为0.5ml普鲁士蓝染色受损细胞术定量分析中的可用缓存数据液。 ③. 做出流式肿瘤细胞术肿瘤细胞术定量分析，判断FITC管道中的DMAO，并且 PE或PE-Texas Red?管道中的EthD-III。