最次做荧光素酶检则试验的男子伴，将会晤临一些的困难。这样，最终怎样入门学习该试验，您又有哪类都要主意的困难了？令天小艾带您来一探最终。

1. 什么是萤光素/萤光素酶检测?它如何起作用？

在自然环境界中，当有机化学能图片转换为光能时，马上会发生的的菌物制品制品会亮。萤火虫，念珠菌和海底菌物制品制品等诸多菌物制品制品都出至多种不同原由出显菌物制品制品会亮。当萤光素酶促使萤光素的氧化想法致使会亮时，马上会发生的的该过程中 。想法差向异构以下图下图：

 

2. 萤光素酶检测的主要用途是什么？

萤光素酶是检查测量再启动子抗弯强度和活性氧的好措施。例如，如果您想研究启动子区域内的转录，可以将荧光素酶基因置于启动子后面。转录该基因后，您将根据产生的荧光强度知道自己是否具有强大ꦜ的启动子。检测中产生更强的荧光意味着更多的荧光素酶被转录，这意味着您具有更强的启动子。 您也可能会遇到🍎的另一个问题是，如果要检测基因表达，何时选择荧光素酶测定法，何时选择qPCR。要记住的是：qPCR方法将测量基因的转录本。它不会告诉您转录的控制。但是，使用萤光素酶可以测量启动子的和转录调控。还要考虑的另一件事是，您想要研究基因调控的深度。您可能会发现，必须同时执行这两种技术才能了解项目的主要方面。  

3. 我需要怎么进行荧光素酶检测？

领域	研究类型	试剂	仪器	孔板/管
生物光学成像	细胞、活体动物（如：小鼠）	荧光素酶检测试剂/荧光素酶检测试剂盒	酶标仪/单管发光仪	微孔板/微量离心管

注：1.试剂：您可以选择一个试剂盒来进行实验，它会包含您需要的所有必要成分；您也可以选择试剂，再配制或购买其他实验中的必要成分。如果您购买的是单独的欧宝体育官方 ，那么欧宝体育官方 建议您考虑质量，尤其是在荧光素各方面。饱和度的对比会存在不良影响。而采血管盒具备有特别大的生活效率性，例如，您不必制作缓冲液，因为试剂盒中已经提供了它。制备萤光素储液时，无需称量，因为您的萤光素已经过测量。它还在您的实验设置中提供了统一性。2.仪器：首先检查您的仪器是酶标仪还是单管发光字检查仪，确认您的仪器是否带有进样器。同时取人您的仪器在什么波长下工作以及在什么温度下工作。所有这些都将帮助您进一步规划实验。（酶标仪可以读取孔板中的样品。基本空间在96到384孔间；单管发光检测仪，将读取单个微量离心管。）3.孔板/管：对于这种测定类型，就必须的使用平低的板（不要使用圆底或者V型底的孔板）。它们是专门为光学检查和细胞培养应用而设计的。白色的孔板使您可以看到裂解物，但缺点是相邻的孔中的背景可能会影响您的观察。黄白色的孔板可以防止出现这种背景。但是看不到自己的裂解物。底边公开的白板可以解决可见性和背景问题。

4. 萤光素酶检测的推荐步骤：

最先要确定您是实施多重申请书DNA检查是不是单一个申请书DNA检查。荧光素酶检查的个人建议部骤下面：

a. 选择荧光素酶报道基因（萤火虫荧光素酶或海肾荧光素酶等）。如果要进行双重报告基因检测，则萤光素酶需要进行不同的光谱检查。 b. 将报告基因克隆到质粒中。如果您要进行双重报告基因检测，则将其他报告基因克隆到单独的质粒中。 c. 将质粒与实验细胞共转染。 d. 经过24至48一小时培养后，取出培养基并裂解神经细胞。 e. 将包含萤光素的缓冲液添加到裂解物中，使用酶标仪进行测试。

这些关键步骤之一是小编建议的通常关键步骤之一，实践时候应选择具体化的定量分析结构类型和实践设置，对实践方法步骤实现相同的調整。  

Biotium荧光素酶检测相关欧宝体育官方 推荐：  

更多的详细信息请参与：

看见这有，您喜欢你了？立马取得联系小艾吧！