脂肪酸摄取
长链脂肪酸(LCFA)作为β-氧化的底物是动物重要的燃料来源,是许多不同细胞结构的基石。长链未酯化脂肪酸(LCFA)通过膜转运蛋白(CD36、FABP等)转运到细胞中,细胞中LCFA水平升高在糖尿病、肥胖相关疾病、心血管疾病和某些形式的癌症中很常见。因此,脂肪酸摄取是代谢性疾病治疗的重要靶点,也是代谢研究的重要课题。Assay Genie的基于细胞的脂肪酸摄取检测试剂盒(cat#BA0184)利用荧光脂肪酸类似物,该类似物被脂肪酸转运蛋白摄取并在细胞内积累。加入荧光猝灭试剂以阻断培养基中细胞外的荧光信号。细胞摄取脂肪酸类似物,通过检测λex/em = 488/523nm处荧光信号的增加评估细胞中的脂肪酸摄取活性,并进行激活剂和抑制剂的筛选。
货号 | BA0184 |
名称 | Fatty Acid Uptake Assay Kit 脂肪酸摄取试剂盒 |
规格 | 100 Tests |
样本 | 脂肪细胞和其他脂肪酸转运细胞 |
应用 | ① 全细胞长链脂肪酸摄取的测定。 ② 评价配体或药物对脂肪酸运输的影响。 |
优势 | 安全:非放射性测定。 快速和敏感:同质“添加-读取”试验。无需洗涤,裂解或染色步骤。 简单方便:可以自动作为高通量分析脂肪酸运输和调节筛选细胞。 |
图2. 3T3-L1细胞脂肪酸摄取测定:将3T3-L1细胞以每孔60,000个细胞的密度接种,并进行饥饿处理。左上方:在无胰岛素和存在160 nM胰岛素以及30 μM竞争剂2-溴棕榈酸酯的情况下,3T3-L1细胞的分化和未分化活性。右上方:3T3-L1脂肪细胞对胰岛素的脂肪酸摄取增加。左下方:2-溴棕榈酸酯的脂肪酸转运抑制曲线。抑制剂与工作试剂一起加入,而不是在30分钟的预孵育期间加入。右下方:槲皮素的脂肪酸转运抑制曲线。抑制剂在运行前孵育30分钟。
脂肪酸氧化
碳水化合物酸脱色(Fatty Acid Oxidation,FAO)是肉碱棕榈酰转让酶 1和2(CPT1和CPT2)将长链碳水化合物酸转运公司到线粒体栽培基质后经羟酰基辅酶a脱色为乙酰辅酶a、NADH和FADH2并转换成精力的阶段,碳水化合物酸脱色划分为四歩: 1)酰基辅酶A脱氢酶崔化脱氢影响。2)烯酰辅酶A水合酶离子液体水合帮助,完成双键移除水。 3)3-羟酰基-辅酶A脱氢酶催化反映脱氢反映,导致NADH。 4)β-酮硫解酶催化反应硫酯裂解,裂解最末端乙酰基辅酶A基团并组成新的酰基辅酶 A,新酰基辅酶A比原酰基辅酶A短一个碳电子层。脂肪酸β-氧化系统在人类中的重要性通过一组称为脂肪酸氧化障碍(FAODs)的遗传疾病得到了体现。FAODs是一类脂肪酸运输和氧化缺陷的异质性疾病群,以常染色体隐性遗传方式传递,临床表现范围广泛。此外,证据表明,胎儿发育期间对FAO活性的调节不仅对胎儿生命至关重要,而且对成年期的健康和疾病也有影响。因此,FAO活性的测量为许多疾病的病理生理和代谢基础提供了有价值的见解。Assay Genie的非放射性FAO检测试剂盒基于底物辛酰辅酶A的氧化反应。产生的NADH与还原反应产生的四唑盐INT结合形成甲瓒。甲醛产物在492nm处表现出最大吸收,因此甲瓒的吸收强度与增加的FAO活性成正比。
货号 | BR00001 |
名称 | Fatty Acid Oxidation Assay 脂肪酸氧化检测试剂盒 |
规格 | 48 assays |
样本 | 细胞裂解液,组织裂解液 |
研究领域 | 对健康和病理状态下的代谢途径和过程进行研究(脂质代谢)。 研究信号转导途径; 研究遗传性疾病,例如脂肪酸氧化障碍(FAODs); 研究心血管疾病,例如心力衰竭; 研究胎儿发育期间的细胞能量代谢; 研究脂肪酸氧化在癌症代谢中的意义。 |
除了脂肪酸摄取和脂肪酸氧化检测试剂盒,Assay Genie的游离脂肪酸检测试剂盒提供了一个简单的,一步和高通量测定游离脂肪酸。在这个实验中,游离脂肪酸被酶转化为酰基辅酶a,随后转化为H2O2。所得的H2O2与特定的染料反应形成粉红色的产物。570nm处的光密度或荧光强度(530/585 nm)与样品中游离脂肪酸浓度🤪成正比。
货号 | BA0101 |
名称 | Free Fatty Acid Measurement Kit 游离脂肪酸检测试剂盒 |
规格 | 100 assays |
样本 | 血清,血浆,尿液,唾液,牛奶,细胞培养,食品 |
应用 | 用于脂肪酸的定量测定及药物对其代谢作用的评价 |
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